Resumen Introducción: La enfermedad de Chagas es una infección parasitaria crónica sistémica, de importancia global, causada por Trypanosoma cruzi. Objetivo: Determinar la prevalencia de anticuerpos contra T cruzi en mujeres embarazadas en el estado de Morelos, México. Materiales y Métodos: Se analizaron 1.620 sueros de mujeres embarazadas mediante dos pruebas serológicas: ELISAc (antígeno crudo nativo) y ELISAr (antígeno recombinante, no nativo). Las muestras reactivas se analizaron posteriormente mediante hemaglutinación indirecta (HAI). Se utilizaron dos enfoques de detección, en paralelo (son positivas las muestras reactivas por cualquier método) y en serie (son positivas las muestras confirmadas por HAI). Se evaluaron factores sociodemográficos y de salud asociados a la presencia de anticuerpos contra T. cruzi mediante razones de momios al 95%. Resultados: Se obtuvo una seroprevalencia de 4,87% con el diagnóstico en paralelo y de 0,43% en serie. A partir de los resultados en paralelo las mujeres que fueron atendidas en los hospitales generales de Tetecala y Jojutla tuvieron, respectivamente, 2,2 y 2,0 veces mayor posibilidad de presentar anticuerpos contra T cruzi con respecto a las mujeres que fueron atendidas en el Hospital General de Cuautla. Conclusión: La prevalencia de anticuerpos contra T cruzi en mujeres embarazadas en el estado de Morelos fluctuó entre 0,43 y 4,87%, según el antígeno y el abordaje utilizado. Es necesario continuar con la vigilancia de la seroprevalencia de anticuerpos contra T cruzi en mujeres embarazadas en el estado de Morelos, México, con las técnicas de mayor sensibilidad y especificidad disponibles.