Resumen: El principal objetivo de este estudio es determinar el nivel de cuantificación necesario para detectar Escherichia coli O157 enterohemorrágica utilizando la reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Se desarrolla la validación de PCR convencional evaluando sus genes de mayor virulencia: stx1, stx2 y rfbE. Los resultados de sensibilidad de PCR indican un límite de detección entre 0,011 y 0,33 ng µL-1 de ADN para stx1 y stx2 y de 0,0037 ng µL-1 de ADN para rfbE. El límite de corte inferior varía entre 0,033 y 0,099 ng µL-1 de ADN para stx1 y stx2, para rfbE es de 0,033 ng µL-1 de ADN. La selectividad (inclusividad y exclusividad) y la robustez son del 100% para los tres genes, demostrando la reproducibilidad del PCR para distinguir E. coli O157 de otros serotipos. Se concluye que la PCR convencional es una técnica que permite monitorear la presencia de E. coli O157 mediante sus genes de mayor virulencia (stx1, stx2 y rfbE).