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AAV purification by anion-exchange chromatography purificación de AAV mediante cromatografía de intercambio aniónico
Indexado
Scopus SCOPUS_ID:85080116839
DOI 10.21931/RB/2019.04.01.4
Año 2019
Tipo

Citas Totales

Autores Afiliación Chile

Instituciones Chile

% Participación
Internacional

Autores
Afiliación Extranjera

Instituciones
Extranjeras


Abstract



We describe a new optimized, scalable and reproducible method based on anion exchange chromatography to obtain high titers of rAAV vectors without empty capsids contamination. The method takes advantage of Q-sepharose matriz to development a scalable procedure. After the virus harvest from supernatant and lysate cells, virus crude was subjected to anion exchange chromatography with Q-sepharose column. Three different protocols were tested, and the elution peaks were evaluated through qPCR rAAV titration and 260/280 nm ratio determination in order to identified empty capsid-containing fractions. A 150 mM NH4Ac wash step fallowing by 1 M NaCl elution step generate a a high titer eluted fraction of rAAV with 1.334 260/280 nm ratio. The described method makes rAAV vector purification an easily adapted for a large scale GMP production format to produce empty capsid free rAAV for clinics.

Revista



Revista ISSN
Revista Bionatura 1390-9347

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Disciplinas de Investigación



WOS
Sin Disciplinas
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Biotechnology
Applied Microbiology And Biotechnology
Infectious Diseases
Epidemiology
SciELO
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Colaboración Institucional



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Autores - Afiliación



Ord. Autor Género Institución - País
1 CAMACHO-CASANOVA, FRANK Hombre Universidad de Concepción - Chile
2 CERRO-GARRIDO, RITA PAULINA Mujer Universidad de Concepción - Chile
3 Varas, N. - Universidad de Concepción - Chile
4 Leiva, M. J. - Universidad de Concepción - Chile
5 TOLEDO-ALONSO, JORGE ROBERTO Hombre Universidad de Concepción - Chile
6 Sanchez, Oliberto - Universidad de Concepción - Chile

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Financiamiento



Fuente
Fondo Nacional de Desarrollo Científico y Tecnológico
Fondo Nacional de Desarrollo Científico y Tecnológico

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Agradecimientos



Agradecimiento
We want to thanks to Fondecyt Grant # 3140153 for funding this work.

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